胰蛋白酶是一种动物源性产品,是培养细胞过程中最常用的酶,胰蛋白酶是一种胰丝氨酸肽链内切酶,作用于多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧。胰蛋白酶溶液作为细胞分离试剂广泛应用于贴壁细胞的连续培养。胰蛋白酶水解或胰蛋白酶化是蛋白质被胰蛋白酶消化或处理的过程,因此被称为 胰蛋白酶化。
大多数细胞在体外培养时生长为附着在基质上的单层细胞层。当进行贴壁细胞传代时,这些细胞间及细胞与基质之间的连接必须分离。蛋白水解酶,如胰蛋白酶(即丝氨酸肽酶),通过打破特定氨基酸之间的肽键,分离细胞与细胞基质,实现细胞的传代培养。EDTA 是一种二价金属离子螯合剂,用于结合抑制胰蛋白酶活性的钙离子和镁离子。
适用于贴壁细胞的消化传代;也可用于组织细胞分离的初步消化。
螯合剂
EDTA
细胞类型
哺乳动物细胞
最大浓度
1X
形式
液体
产品类型
细胞培养解离试剂
形式
液体
无菌
无菌过滤
添加剂
酚红,EDTA
渗透压
275-310 mOsm/kg
【使用方法】
1. 以 T25 培养瓶为例,细胞传代时,先将培养瓶中 的培养基吸弃,加入 3ml PBS 或 DPBS 冲洗细胞, 吸弃。
2.加入1ml 胰酶消化液A,浸润整个底面,放入37℃ 培养箱中消化 3-5min,取出后,用 3ml 完全培养基 中和,然后 300-400xg 离心 3min。吸弃上清液。
3.加完全培养基重悬细胞,按照所需量进行传代。