MycoEZ 支原体检测试剂盒-M5010
【产品介绍】
MycoEZTM支原体检测试剂盒可对细胞培养物进行快速、高灵敏的支原体污染检测,可以检测出的支原体种类如下:
Mycoplasma Group |
Strains |
|||
Mycoplasma spp. |
M. arginini |
精氨酸支原体 |
M. hyorhinis |
猪鼻支原体 |
M. arthritidis |
关节炎分支原体 |
M. orale |
口腔支原体 |
|
M. bovis |
牛支原体 |
M. pirum |
梨支原体 |
|
M. capricolum |
山羊支原体 |
M. pneumonia |
肺炎支原体 |
|
M. fermentans |
发酵支原体 |
M. pulmonis |
肺支原体 |
|
M. hominis |
人型支原体 |
M. salivarium |
唾液支原体 |
|
M. hyopneumoniae |
猪肺炎支原体 |
M. yeatsii |
酵母支原体 |
支原体检测试剂盒包含以下组分:
Component |
M5010-0025 (25 preps) |
MycoEZTM Lysis Buffer A ( Blue ) |
200 μL |
MycoEZTM 2X Probe Fast qPCR Master Mix ( Brown ) |
125 μL |
MycoEZTM Positive Control 1000 copies/μL ( Orange ) |
18 μL |
MycoEZTM Negative Control ( Yellow ) |
18 μL |
MycoEZTM 20X TaqMan Assay Dye ( Green ) FAM labeled (Ext.~490 nm/ Emi.~520 nm) |
12.5 μL |
Nuclease-Free Water ( Translucent ) |
1 mL |
【使用方法】
(A)样本准备
- 取 50 μL细胞培养液等样本至0.5 mL离心管内,放入离心机,以2000 ×g离心3 min。
- 用移液器小心地弃掉上清(约50 μL)(可能沉淀不可见)。
- 取8 μL MycoEZTM Lysis Buffer A 到 0.5 mL 离心管内,吹打均匀。
- 用移液枪上下吹打,使沉淀溶解,准备qPCR反应。
(B)qPCR 反应液准备
qPCR 反应体系为 10 μL,各试剂如下表,加入PCR管中:
Component |
Volume for one 10 μL reaction |
||
Test (μL) |
Positive Control (μL) |
Negative Control (μL) |
|
Nuclease-Free Water |
2.5 |
2.5 |
2.5 |
MycoEZTM 20X TaqMan Assay Dye |
0.5 |
0.5 |
0.5 |
MycoEZTM 2X Probe Fast qPCR Master Mix |
5 |
5 |
5 |
Digested lysate |
2 |
0 |
0 |
MycoEZTM Positive Control |
0 |
2 |
0 |
MycoEZTM Negative Control |
0 |
0 |
2 |
Total volume (μL) |
10 |
10 |
10 |
(C)qPCR 实验
Step |
Time |
Temp. |
Data Collection |
Note |
Hold |
1 min |
95°C |
|
★ Polymerase Activation |
Cycle ( 35 ) |
3 sec |
95°C |
■ |
Denature / Anneal / Extend |
30 sec |
60°C |
★ 聚合酶激活需要超过1分钟 ■ FAM标记 (Ext.~490 nm / Emi.~520 nm)
(D) 分析数据
- 手动设置阈值为0.2。
- 阴性对照无荧光信号,阳性对照(2000 copies)=Ct 28±1。
- 确定每个样本Ct值(计算样本支原体拷贝数)。
- 支原体拷贝数计算器网站链接:
http://www.xpbiomed.com/newsinfo/7178381.html
填写样品Ct值,自动计算支原体拷贝数(copies/uL)
【储存条件及保质期】
该试剂盒的所有组分需在-20℃环境中保存,有效期24个月。
【说明书批准生效日期】
批准日期: 2024年4月3日
【资料下载】
英文:MycoEZ Mycoplasma qPCR Kit
货号:M5010-0025
规格:25 preps
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