外泌体提取服务
外泌体抽提
Dr.Cell实验室采用超速离心方法从细胞培养上清液、血清、血浆、尿液、脑脊液以及其他体液(腹水、羊水、乳液以及唾液等)中的提取外泌体,获取的高纯度外泌体颗粒,可进行后续的NTA、TEM、WB等分析。
样本准备
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细胞上清 Cell culture supernatant
细胞培养基必须使用去除 exosome的血清(如去外泌体胎牛血清,Exosome depleted Fetal Bovine Serum, VivaCell P/N: C38010050 )或者无血清培养基,以降低背景值的干扰(牛血清中含有大量牛源外泌体)。
1)细胞在正常含有血清的培养基中培养一定时间,细胞增长至约70%;
2)对于贴壁细胞,去除原有培养基,用PBS洗涤,更换新的含去外泌体血清的培养基或者无血清培养基;对于悬浮细胞,300×g,4℃,10分钟收集细胞,用PBS洗涤,使用不含外泌体的培养基或者无血清培养基悬浮细胞并继续培养;
3)细胞继续培养24-48小时,根据细胞的生长速度确定收取上清时间;
4)收集细胞上清,300×g,4℃,离心10分钟;小心吸取上清,注意避免吸入细胞或者细胞碎片;
5)上清0.22µm过滤,去除细胞碎片、凋亡小体和微囊泡;
6)将上清样本冻存于-80℃。
建议送样量:20ml以上 -
血浆 Plasma
1)取全血至EDTA抗凝管中,轻柔混匀;
2)4°C条件下,2500×g,离心15min,取上清;
3)再次2500×g,离心15min,取上清即为血浆;
4)血浆于-80°C保存。
建议送样量:2ml以上 -
血清 Serum
1)将4ml全血置于普通采血管中(注意收集血清样本不要加入抗凝剂)37℃凝固20-30 min;
2)2000×g离心10 min,取上清,淡黄色透明液体即为血清;
3)将血清置于-80°C保存。
建议送样量:2ml以上 -
尿液 Urine
1)无菌容器收集清晨第一次尿液50ml;
2)加入蛋白酶抑制剂混合物(1.67 ml of100mM NaN3, 2.5ml PMSF (2 mg/ml in isopropyl alcohol), 50 µl Leupeptin (1 mg/ml in ddH2O));
3)立即处理或置于-80°C保存。
建议送样量:20ml以上
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脑脊液 Cerebrospinal fluid
1)收集脑脊液,放置冰上静置30min;
2)4℃ ,2000×g,离心10分钟,去除细胞或细胞碎;
3)取上清,立即处理或置于-80°C保存。
建议送样量:10ml以上
样本寄送
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一般不上门取样,请用快递寄送。生物样本应避免反复冻融,当天或次日可到可用冰袋,否则请用干冰,可混冰袋,干冰若挥发完可继续保持低温。
*下单需要填写物流信息,请在寄出样本后保留物流单号并下单。
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为保证样本接收无误,可随样本附上您的联系方式和样本数量,谢谢!
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收样信息如下:
收样地址:上海市奉贤区汇丰西路2082号9幢4楼
收样人:希尔博士
电话:18918495545*请尽量避免我处周末收件,如不可避免,请提前来电 021-58785545-8808 告知,谢谢!
检测周期
实验室收到样本后10-15个工作日内完成检测,提供外泌体抽提步骤和报告。
下单方式
关注逍鹏微信公众号(xpbiomed)→进入右下角“检测服务”→立即下单 | |
寄送地址:上海市奉贤区汇丰西路2082号9幢4楼; 联系信息:希尔博士,18117146819 |
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产品咨询请联系 | |
Tel:021-58785545-8808 |
报告交付
全款到账后交付所有检测数据;或个人先行交付押金(全部检测费用的100%),则交付所有检测数据,我司对公账户收到全款后将押金原路退回;
*支付宝交付押金时请备注“单位+押金”
特别注意事项
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下单后可自行查看检测进度(个人中心→我的订单);
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本司默认仅寄送发票(检测服务类发票,含6%税费)供委托检测方报销使用,如需其他材料请提前说明,在下单页面的备注栏中填写。否则,涉及二次寄送则一律到付,特此告知。
保密承诺
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客户提供产品的检测信息与数据,履行保密义务,未经客户许可,不得擅自公开发表或使用,不得泄露给第三方。检测产品仅做数据统计用。
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