TheWell Vitrogel 水凝胶动物体内注射- Xenograft FAQ (中文版)
Q VitroGel水凝胶的注射量是多少?
A 小鼠模型:大多数客户使用100-200 μL(根据细胞类型)的注射量。
大鼠模型:注射量约为500 μL。
Q VitroGel水凝胶建议的注射细胞数是多少?
A 根据不同的细胞类型,典型的植入细胞数在1-10 × 106之间。可以在PBS中制备细胞悬液,得到2-20 × 107个细胞/ mL,然后以1:1的比例与VitroGel混合。细胞密度可根据接种量(如100或200μL)以及VitroGel与细胞悬液的混合比例进行调节。
Q 需要将VitroGel-Cell混合物保存在冰桶中吗?
A 不需要。
与Matrigel不同,VitroGel是可以在室温下与细胞悬液混合的。在水凝胶和细胞悬液混合并转移到注射器后,可以将混合物放在冰上或4摄氏度,5-10分钟,以加速可注射水凝胶的形成,并确保细胞悬液均匀。之后,水凝胶可在室温下保存,可长期注射。或者,如果您不想使用低温,只需在注射前将VitroGel-Cell混合物在室温下放置15分钟以稳定凝胶。VitroGel具有独特的剪切变薄 和快速恢复特性,可以保持长期注射状态和注射后良好的细胞保留率,没有针头堵塞问题。
Q 与Matrigel相比,VitroGel-Cell混合物可保持注射状态多长时间?
A 不需要。
与温度高于10摄氏度时会快速凝固的Matrigel不同,VitroGel-Cell混合物会形成柔软的可注射水凝胶。水凝胶具有独特的剪切变薄 和快速恢复特性,使其能够保持注射状态数月以上。
Q 注射VitroGel后,细胞保留效率如何?
A 注射后,溶胶-凝胶转变立即发生,这重建了水凝胶的机械强度,并将细胞保持在水凝胶基质内。因此,我们的水凝胶系统在注射后 具有良好的细胞保留率。
Q 在与VitroGel混合之前,我必须在细胞悬液中添加血清,生长因子或补充剂吗?
A 对于大多数异种移植应用,细胞PBS溶液与VitroGel混合后就能起到很好的效果。另一方面,VitroGel是无动物来源的,这给研究 人员提供了灵活性,如果需要,可以在VitroGel-Cell混合物中添加因子或补充剂。
Q 如果我想添加补充剂来促进细胞生长,常用的生长因子或成分是什么?
A 添加的生长因子取决于您的应用系统。常见的有BSA、HSA、血清替代物等。如果血清不会干扰实验,您也可以添加FBS。
Q 在与VitroGel混合之前,在细胞悬液中加入高浓度的血清和其他细胞因子是否会导致气泡的形成?
A 不会。
由于水凝胶的低粘度,一般不会形成气泡。不过在混合之前,可以选择37℃水浴介质和水凝胶溶液,因为这可以帮助降低粘度。
Q VitroGel能否用于小鼠不同部位的注射?
A 可以。
VitroGel允许不同的注射部位,如皮下,原位,腹腔注射等。一些难以用动物基质进行的注射可以用VitroGel顺利进行注射。
Q 在VitroGel中肿瘤的成瘤率是多少?
A VitroGel在肿瘤形成方面表现非常好。典型细胞类型的成瘤率几乎为100%,一些困难细胞类型的成瘤率甚至超过70%。在大多数细胞类型中,VitroGel中的肿瘤生长动力学快于或等于Matrigel。
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