作一个漂亮的外泌体浓度粒径图的正确方式
Dr.Cell实验室在检测外泌体NTA,
提供NTA检测报告时,
经常会被问到:
你们可以提供文献中的粒径图么?
文献中的粒径图怎么作的?……
今天就和小编一起来Get新技能,
学习怎么用Origin软件绘制出文献中NTA粒径图!
01 获得数据
Dr.Cell实验室检测外泌体NTA会提供完整的数据,每个样本每检测一次,将得到以下5个文件(一个样本将至少检测3次,所以一个样本会有3组如下数据)。
①均视频档:记录颗粒的布朗运动状态
②检测报告:PDF(下文中有详细解读说明)
③原始数据:记录检测过程中仪器的温度、电导率等参数,以及原始数据
④检测说明:记录11个位点的检测情况
⑤原始文件:可通过ZetaView软件打开
02 制图
获得以上5个文件后,我们将用文档③中原始数据进行作图,取“Size Distribution”至 “-1 -1 -1 -1” 之间的数据直接将数据复制至Origin软件工作表中(图1)。
【图1】
图1中C列中“E+6”无意义,直接去掉。选中A与C列,右键点击Plot→Line→Line,得到粒径浓度图(图2)
【图2】
03 调整参数
得到粒径图后,需要调整数据参数,首先要双击粒径图中纵坐标,弹出“Y Axis”框,“Display”选择“Scientific:1E3”(图3)。
【图3】
点击“Scale”,“From”选项可以调整为“0”,也可以不调整。“Increment”调整纵坐标单位刻度,此例中调整为“50000”(图4)。
【图4】
【调整纵坐标后的粒径图】
接下来调整横坐标,双击横坐标刻度数值后,点击“Scale”,“From”选项可以调整为“0”,也可以不调整。“To”选项可以调成“600-1000”,“Increment”调整纵坐标单位刻度,此例中调整为“100”(图5)。
【图5】
【全部调整完后的粒径浓度图 】
04 平滑处理
调整完参数后,得到一个新的粒径图,这只是原始图,仍需要对其进行平滑处理,得到最终想要的结果。
点击菜单栏中“Analysis”,“Signal processing”,“Smooth”,选择“Open Dialog”(图6)。
【图6】
弹出框“Output”选项选择“XY = input XY”, 即在原图上直接调整(图7)。
其中“Points of Window”是调整平滑度的,一般可以不用调整,数字越大越失真。
【图7】
【调整后的粒径图】
继续双击峰图跳出“Plot Details”可调整峰图颜色、线条、宽度等(图8)。
【图8】
全部调整完,就是最终在文献中的出现的粒径图了。
【最终粒径图】
【文献中的粒径图 (ref.1) 】
由于软件用的Origin9存在bug,
坐标轴刻度线未展示。
希尔博士推荐科研小伙伴们可以选择用Origin8 。
Reference
Zhang.S et al . Exosomes derived from human embryonic mesenchymal stem cells promote osteochondral regeneration. Osteoarthritis and Cartilage 2016,11:2135-2140.
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